液質聯用技術HPLC-MS/MS

利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液中等復雜樣本進行蛋白鑒定。


技術原理

HPLC-MS/MS又叫高效液相色譜-質譜聯用技術,它以液相色譜作為分離技術,質譜作為檢測系統。樣品在質譜部分和流動相分離,被離子化后經過質譜儀質量分析器將離子碎片按質量數分開,經檢測器的到質譜圖,液質聯用體現了色譜和質譜的優勢互補,將色譜對復雜樣品的高分離能力,與MS具有高選擇性、高靈敏性及能夠提供相對分子質量與結果信息的優點結合起來,在藥物分析、食品分析和環境分析等許多領域的到了廣泛的應用。


技術路線

                        


儀器類型

Thermo-Scientific Q Exactive


應用范圍

相互作用蛋白復合體或多肽的鑒定


技術優勢

適合復雜樣品的蛋白鑒定,如相互作用洗脫的蛋白混合液、膠條等

周期短,通量高


樣品要求

1.雙向凝膠膠點:考染、銀染(質譜兼容)點清晰可見

2.SDS-PAGE條帶:考染、銀染(質譜兼容)點清晰可見

3.蛋白質溶液:蛋白總量>5μg,濃度>0.1μg/ul,緩沖液不含去污劑SDS、NP40,Triton X-100等

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